Ao manusear microrganismos, é importante usar corretamente uma técnica asséptica - tanto para evitar que seus microrganismos sejam contaminados por forças externas, quanto para proteger você e as pessoas ao seu redor.
Passos
Etapa 1. Proteja-se
Prenda o cabelo comprido e use um jaleco e óculos de proteção.
Etapa 2. Lave suas mãos e sua área de trabalho
Lave as mãos com água e sabão e borrife a bancada com etanol 70%.
Etapa 3. Organize todo o seu equipamento
Certifique-se de ter tudo pronto antes de começar.
Etapa 4. Ligue o bico de Bunsen o mais alto possível
Você precisará dele para esterilizar seu equipamento, e a corrente de ar para cima evita que contaminantes externos caiam em sua cultura.
Gire o colar para que o fluxo de ar fique totalmente aberto
Etapa 5. Esterilize a alça de inoculação
Segure-o em um ângulo de cerca de 45 ° para baixo e mova-o lentamente através da chama de forma que ele fique vermelho-esbranquiçado.
- É mais fácil segurar a alça entre o polegar e o dedo indicador e apoiá-la com o dedo médio.
- A parte mais quente da chama está bem na ponta do cone de fogo azul interno.
Passo 6. Use a outra mão para agarrar sua cultura original
- Se for um prato, segure-o e abra a tampa apenas o suficiente para colocar o laço dentro.
- Se for um tubo com tampa, use o dedo mínimo da mão com a qual você está segurando o laço de inoculação para remover a tampa e, em seguida, arraste rapidamente a abertura do tubo através da chama do bico de Bunsen duas vezes. Isso é chamado de flaming e mata qualquer coisa que queira entrar no tubo, e cria uma corrente de convecção que força o ar para fora do tubo, de forma que nada possa capturá-lo. Continue segurando a tampa com o dedo mínimo para a próxima etapa.
Etapa 7. Inocular
Toque o ciclo de inoculação em uma colônia que deseja coletar. Se você estiver inoculando com caldo líquido, mergulhe a alça de inoculação no tubo e sacuda a alça para ter certeza de obter bactérias suficientes.
Etapa 8. Feche a cultura original
Se for um prato, feche a tampa e coloque-o de volta na mesa. Se for um tubo, arraste a abertura através da chama do bico de Bunsen duas vezes e, em seguida, coloque a tampa novamente.
Etapa 9. Abra a nova placa
Como antes, use sua mão livre para abrir a tampa apenas o suficiente para colocar o laço
Etapa 10. Placa as bactérias
Passe levemente a alça de inoculação sobre a superfície, tomando cuidado para não penetrar no ágar.
Um padrão comum de listras é o método dos quadrantes
Etapa 11. Feche a placa
Etapa 12. Esterilize a alça de inoculação
Como antes, segure-o em um ângulo de 45 ° para baixo e mova-o lentamente através da chama para que fique vermelho-esbranquiçado.
Pontas
- Em geral, as luvas não são necessárias. Todas as etapas acima servem para proteger você e suas bactérias, portanto, o risco de contaminação é muito baixo. Luvas podem causar queimaduras desagradáveis se você acidentalmente tocá-las com a alça de inoculação quente.
- Lembre-se de que você está trabalhando com fogo. Não é grande coisa, apenas certifique-se de saber o que fazer se você se queimar; pause o experimento, enxágue a queimadura com água e, se necessário, notifique seu supervisor.
- Se você estiver fazendo várias execuções de ter que usar uma técnica asséptica, não é necessário desligar completamente o bico de bunsen entre as execuções - apenas abaixe até a chama piloto e desligue-o totalmente quando terminar.
